Titrering av tumor celle dose med B16-F10 og CT26 tumor modeller
Vaccibody AS ønsker å utvikle pasient-spesifikke terapeutiske kreft vaksiner mot tumor spesifikke antigener – kalt neoantigener – som kommer fra somatiske genmutasjoner som oppstår kun i ondartede kreftsvulster under neoplastisk transformasjon og som ikke vil være tilstede i normalt vev. Med sine prekliniske forsøk, vil Vaccibody få vitenskapelig data som skal brukes til å utarbeide søknader om å gjennomføre to nye kliniske studier i to ulike kreftindikasjoner basert på neoantigener. Med disse pasient spesifikke vaksinene vil flere kreftpasienter få mulighet for å få behandling. I sine pre-kliniske forsøk, ønsker Vaccibody å bruke en B16.F10 melanoma og en CT26 kolon kreft mus cellelinje som modeller for å bevise at et Vaccibody DNA vaksineformat med neoantigener vil kunne gi en immunologiske respons. Neoantigenene i B16.F10 og CT26 har allerede blitt beskrevet og testet som RNA og peptid vaksiner (Castle et al, 2012 + 2014 og Kreiter et al, 2015) så disse neoantigenene vil bli brukt å teste immunologiske responser i mus med Vaccibody DNA vaksiner.
Med de nye tumor cellelinjene B16-F10 og CT26 som vi ønsker å bruke i senere tumor challenge studier, må vi gjøre et forsøk først hvor vi titrerer inn dosen (antall tumorceller) som gir tumor-take i 100 % av musene ved et optimalt tidspunkt i forhold til vaksinering med Vaccibody DNA neoantigen vaksiner. Det vil si at mus injiseres med den aktuelle tumorcellelinjen i 3 ulike doser og deretter måles vekt og tumorutvikling over 30 dager. Den optimale dosen tumorceller vil bli valgt utifra 100 % tumortake i alle musene og ønskelig vekst av tumor rundt dag 10-15 etter injeksjon.
Forsøkene klassifiseres som betydelig belastende forsøk. I dette forsøket vil det bli brukt 60 mus. For å teste evnen Vaccibody DNA neoantigen vaksiner har til å hindre tumorvekst, er in vivo forsøk i mus det eneste tilgjengelig alternativet. Basert på våre erfaringer med denne type forsøk og andre publiserte studier som beskriver eksperimenter med de aktuelle dyremodellene, tilsier at det hensiktsmessig med det antallet dyr som er skissert for å observere signifikante forskjeller mellom gruppene i forsøket. En tumor celle titrering forsøk er nødt til å gjøres før DNA vaksinering kan benyttes for å bestemme et optimalt antall med tumorceller som skal bruke i de kommende profylaktisk og terapeutiske tumor Challenge forsøkene med Vaccibody DNA vaksiner. Dyrene blir bedøvet med sevofluorane under injeksjon av tumorceller og musene undersøkes hver 2. dag for vekst av tumor, kroppsvekt og eventuelle andre humane endepunkter.
Med de nye tumor cellelinjene B16-F10 og CT26 som vi ønsker å bruke i senere tumor challenge studier, må vi gjøre et forsøk først hvor vi titrerer inn dosen (antall tumorceller) som gir tumor-take i 100 % av musene ved et optimalt tidspunkt i forhold til vaksinering med Vaccibody DNA neoantigen vaksiner. Det vil si at mus injiseres med den aktuelle tumorcellelinjen i 3 ulike doser og deretter måles vekt og tumorutvikling over 30 dager. Den optimale dosen tumorceller vil bli valgt utifra 100 % tumortake i alle musene og ønskelig vekst av tumor rundt dag 10-15 etter injeksjon.
Forsøkene klassifiseres som betydelig belastende forsøk. I dette forsøket vil det bli brukt 60 mus. For å teste evnen Vaccibody DNA neoantigen vaksiner har til å hindre tumorvekst, er in vivo forsøk i mus det eneste tilgjengelig alternativet. Basert på våre erfaringer med denne type forsøk og andre publiserte studier som beskriver eksperimenter med de aktuelle dyremodellene, tilsier at det hensiktsmessig med det antallet dyr som er skissert for å observere signifikante forskjeller mellom gruppene i forsøket. En tumor celle titrering forsøk er nødt til å gjøres før DNA vaksinering kan benyttes for å bestemme et optimalt antall med tumorceller som skal bruke i de kommende profylaktisk og terapeutiske tumor Challenge forsøkene med Vaccibody DNA vaksiner. Dyrene blir bedøvet med sevofluorane under injeksjon av tumorceller og musene undersøkes hver 2. dag for vekst av tumor, kroppsvekt og eventuelle andre humane endepunkter.