Konsekvensen av revmatoid arthritt på utvikling av hjertesvikt
Epidemiologiske studier har avdekket at pasienter med revmatoid arthritt (RA) har dobbelt så høy forekomst av hjertesvikt. Årsaksmekanismene er derimot ukjente.
Formålet med forsøket: Studien søker å kartlegge betydningen av revmatoid arthritt (RA) på etablering og progresjon av hjertesvikt ved å avdekke betydningen av kardialt utgangspunkt, samt undersøke mekanistisk årsaksammenheng.
Forventet skadevirkning på dyrene: To intervensjoner vil ha skadevirkning på musene: thorakotomi (under anestesi og analgesi) og konstriksjon av aorta med påfølgende varierende hjertebelastning, samt immunologisk induksjon av monoarthitt.
Forventet nytteverdi av forsøkene: Ved å avklare på et mekanistisk nivå årsakssammenheng mellom RA og hjertesvikt vil vi kunne definere risikogrupper blant pasienter med RA for hjertesviktutvikling. Vi vil dessuten kunne danne grunnlag for nye behandlingsstrategier.
Antall og type dyr: Vi utfører studien både på C57Bl/6 og BALBc-mus. På C57Bl/6 inngår det 6 parallelle grupper (2 ulike aortakonstiksjonsgrader og en shamgruppe, med og uten RA). Mus av begge kjønn vil brukes i studien på BALBc. Totalt sett vil det der inngå 12 parallelle grupper (hankjønn og hunkjønn, 2 ulike aortakontriksjonsgrader og en shamgruppe, med eller uten RA). Hovedendepunkt for begge er systolisk hjertefunksjon (ejeksjonsfraksjon - EF %) målt ved ekkokardiografi og MR. Basert på kjent variasjon av EF% med aktuell modell basert på en definert grad av aortakonstriksjon og en antatt forverret funksjon med samtidig RA på 5 prosentpoeng vil studien trenge totalt 120+240 mus (20 mus i hver gruppe), dette inkluderer forventet frafall på 10% (peroperativ og kort postoperativ død etter aortakirurgi). Vi ønsker å kunne gjenta sistnevnte forsøk 1 gang slik at det der totalt trengs 480 mus.
Vi har også tidligere fått godkjent endringssøknad om RA-induksjon og ORAB på BALBc, og vi holder der på med å utføre piloter med totalt 80 BALBc-mus for å kartlegge hvordan ORAB og RA ved DTH-modellen hver for seg påvirker BALBc-mus.
Info om etterlevelse av 3R: Det finnes ingen alternative studier uten bruk av forsøksdyr som kan erstatte foreslått eksperiment. Hovedhensikten er å studere konsekvensen av den komplekse sirkulatoriske responsen mediert av RA på hjertet. Derimot er både aortakonstriksjonsmodellen og den eksperimentelle RA-modellen raffinert iht alternative modeller som gjør at antall forsøksdyr nødvendige er betydelig redusert. 1) Tradisjonelle aortakonstriksjonsmodeller ved bruk av ligatur og mal medførte både høyere peroperativ mortalitet og en betydelig større variasjon i konstriksjonsgrad. Ved bruk av standarisert ring er peroperativ dødlighet betydelig lavere og forventet belastningsgrad på hjertet mye mer homogen (som gir lavere variasjon og derav bruk for mindre antall dyr). RA modellen valgt gir også en svært høy grad av homogenitet iht sykdomsmanifestasjon sammenlignet med andre modeller og har en adskillig lavere negativ påvirkning på musene. Totalt sett betyr dette både behov for færre forsøkdyr enn alternativene og en klar forbedring iht negativ påvirkning på dyrehelsen.
Formålet med forsøket: Studien søker å kartlegge betydningen av revmatoid arthritt (RA) på etablering og progresjon av hjertesvikt ved å avdekke betydningen av kardialt utgangspunkt, samt undersøke mekanistisk årsaksammenheng.
Forventet skadevirkning på dyrene: To intervensjoner vil ha skadevirkning på musene: thorakotomi (under anestesi og analgesi) og konstriksjon av aorta med påfølgende varierende hjertebelastning, samt immunologisk induksjon av monoarthitt.
Forventet nytteverdi av forsøkene: Ved å avklare på et mekanistisk nivå årsakssammenheng mellom RA og hjertesvikt vil vi kunne definere risikogrupper blant pasienter med RA for hjertesviktutvikling. Vi vil dessuten kunne danne grunnlag for nye behandlingsstrategier.
Antall og type dyr: Vi utfører studien både på C57Bl/6 og BALBc-mus. På C57Bl/6 inngår det 6 parallelle grupper (2 ulike aortakonstiksjonsgrader og en shamgruppe, med og uten RA). Mus av begge kjønn vil brukes i studien på BALBc. Totalt sett vil det der inngå 12 parallelle grupper (hankjønn og hunkjønn, 2 ulike aortakontriksjonsgrader og en shamgruppe, med eller uten RA). Hovedendepunkt for begge er systolisk hjertefunksjon (ejeksjonsfraksjon - EF %) målt ved ekkokardiografi og MR. Basert på kjent variasjon av EF% med aktuell modell basert på en definert grad av aortakonstriksjon og en antatt forverret funksjon med samtidig RA på 5 prosentpoeng vil studien trenge totalt 120+240 mus (20 mus i hver gruppe), dette inkluderer forventet frafall på 10% (peroperativ og kort postoperativ død etter aortakirurgi). Vi ønsker å kunne gjenta sistnevnte forsøk 1 gang slik at det der totalt trengs 480 mus.
Vi har også tidligere fått godkjent endringssøknad om RA-induksjon og ORAB på BALBc, og vi holder der på med å utføre piloter med totalt 80 BALBc-mus for å kartlegge hvordan ORAB og RA ved DTH-modellen hver for seg påvirker BALBc-mus.
Info om etterlevelse av 3R: Det finnes ingen alternative studier uten bruk av forsøksdyr som kan erstatte foreslått eksperiment. Hovedhensikten er å studere konsekvensen av den komplekse sirkulatoriske responsen mediert av RA på hjertet. Derimot er både aortakonstriksjonsmodellen og den eksperimentelle RA-modellen raffinert iht alternative modeller som gjør at antall forsøksdyr nødvendige er betydelig redusert. 1) Tradisjonelle aortakonstriksjonsmodeller ved bruk av ligatur og mal medførte både høyere peroperativ mortalitet og en betydelig større variasjon i konstriksjonsgrad. Ved bruk av standarisert ring er peroperativ dødlighet betydelig lavere og forventet belastningsgrad på hjertet mye mer homogen (som gir lavere variasjon og derav bruk for mindre antall dyr). RA modellen valgt gir også en svært høy grad av homogenitet iht sykdomsmanifestasjon sammenlignet med andre modeller og har en adskillig lavere negativ påvirkning på musene. Totalt sett betyr dette både behov for færre forsøkdyr enn alternativene og en klar forbedring iht negativ påvirkning på dyrehelsen.
Etterevaluering
Forsøket er klassifisert som betydelig belastende og skal derfor etterevalueres.
Begrunnelse for etterevalueringen
Forsøkets formål var å kartlegge betydningen av revmatoid arthritt (RA) på etablering og progresjon av hjertesvikt. Dette kan bidra til en bedre forståelse av årsakssammenheng mellom RA og hjertesvikt, og bedre kunne definere risikogrupper for hjertesviktutvikling blant pasienter med RA. Ny kunnskap kan på sikt danne grunnlag for nye behandlingsstrategier. Det ble satt krav om etterevaluering fordi forsøket kombinerer to moderat belastende modeller, og det var usikkert hvordan disse sammen påvirker dyrene.
Søker angir at alle studier er gjennomført og fullført som planlagt. Gjennomføringen av forsøket vurderes av søkerne som vellykket, og resultatene er allerede publisert. Forsøket viste ingen forverring av hjertesvikt hos dyrene med RA. Grunnet til dette er ikke avklart, og det er derfor planlagt videre studier for å forstå årsaksmekanismene.
Det ble brukt totalt 108 C57Bl/6 og 68 BALBc-mus.
Belastningsgraden vurderes til moderat. Belastningsgraden ble på forhånd satt til betydelig grunnet manglende erfaring med RA kombinert med hjertesvikt (ved aortakonstriksjon). Vurdering fra søker er at belastningen på dyrene ikke var vesentlig forverret enn med aortakonstriksjon alene. Ingen dyr nådde humant endepunkt under forsøket. Det var ingen dyr som viste tegn til signifikant vekttap, eller avvik i oppførsel eller utseende.
Enkelte mindre prosedyreendringer kan implementeres i videre studier for å ytterligere redusere belastningen for dyrene. Som eksempel er det implementert repetitiv blodprøvetaking fremfor høsting av blod ved avlivning. Slik trengs det færre dyr. Ekkokardiografi kan i noen tilfeller erstatte MR, dette er en kortere undersøkelse som vil være mindre belastende. Scoreskjemaer ble benyttet, og fungerte tilfredsstillende.
Søker angir at alle studier er gjennomført og fullført som planlagt. Gjennomføringen av forsøket vurderes av søkerne som vellykket, og resultatene er allerede publisert. Forsøket viste ingen forverring av hjertesvikt hos dyrene med RA. Grunnet til dette er ikke avklart, og det er derfor planlagt videre studier for å forstå årsaksmekanismene.
Det ble brukt totalt 108 C57Bl/6 og 68 BALBc-mus.
Belastningsgraden vurderes til moderat. Belastningsgraden ble på forhånd satt til betydelig grunnet manglende erfaring med RA kombinert med hjertesvikt (ved aortakonstriksjon). Vurdering fra søker er at belastningen på dyrene ikke var vesentlig forverret enn med aortakonstriksjon alene. Ingen dyr nådde humant endepunkt under forsøket. Det var ingen dyr som viste tegn til signifikant vekttap, eller avvik i oppførsel eller utseende.
Enkelte mindre prosedyreendringer kan implementeres i videre studier for å ytterligere redusere belastningen for dyrene. Som eksempel er det implementert repetitiv blodprøvetaking fremfor høsting av blod ved avlivning. Slik trengs det færre dyr. Ekkokardiografi kan i noen tilfeller erstatte MR, dette er en kortere undersøkelse som vil være mindre belastende. Scoreskjemaer ble benyttet, og fungerte tilfredsstillende.