Inhibitoriske internevroner og perinevrale nett
1. Formål: Hjernen er avhengig av en finstemt balanse mellom eksitasjon og inhibisjon for å fungere optimalt. Forskyves denne balansen mot for eksempel for mye eksitasjon kan det oppstå epileptiske anfall og andre lidelser. Vi har i lengre tid studert molekylære mekanismer som er med på å opprettholde balansen slik at hjernen fungerer optimalt. Formålet med denne studien er å forstå egenskapene til spesialisert ekstracellulær matriks kalt perinevrale nett (PNN) og hvordan disse nettene påvirker nervecellene de omslutter i hjernebarken. En hovedgruppe er de parvalbumin positive (PV+) internevronene. Vi ønsker å finne ut PNNs rolle i reguleringen av plastisitet, aktiviteten tilhjerneceller og deres påvirkning på kognisjon. Inhibitoriske internevroner demper aktiviteten til nervecellene de er i kontakt med. Slik inhibisjon er avgjørende for for reguleringen av aktivitet i hjernen. PV celler er også satt i forbindelse med normal hjerneutvikling og endringer i tettheten av og funksjonen til PV+ celler er funnet i sykdommer som schizofreni, epilepsi og bipolar lidelse. Vi ønsker å forstå egenskapene til PV+ celler, og hvordan disse egenskapene påvirkes av perinevrale nett. Vi søker om godkjenning av to typer forsøk: in vivo registreringer av hjerneaktivitet og in vitro målinger fra hjerneskiver. I begge forsøkstypene vil dyrene opereres i forkant for genetisk merking av spesifikke celletyper.
2 Skadevirkning: Basert på tidligere erfaring med slike forsøk anser vi at de fleste av forsøkene klassifiseres som moderat belastende. Dyrene vil gjennomgå en kortvarig operasjon med injeksjon av genetisk markør. Etter noen uker er genutrykket tilstrekkelig til at vi kan gjennomføre forsøk in vivo eller terminale forsøk in vitro.
3 Forventet nytteverdi: Både internevroner og perinevrale nett er tidligere vist å ha stor betydning for normal hjernefunksjon, men vi vet fortsatt lite om samspillet mellom dem og om hvordan de reguleres. Internevroner regulerer ned aktiviteten til nevronene de er i kontakt med og bidrar til å beholde balanse mellom eksitasjon og inhibisjon. Perinevrale nett (PNN) pakkes tett rundt PV+ internevroner og påvirker deres aktivitet og funksjon. Sammen er de essensielle for å regulere balansen mellom plastisitet og stabilitet. Dette er relevant for mange hjernesykdommer (f.eks epilepsi og schizofreni). I dette prosjektet vil vi undersøke hvilken rolle PV+ celler og PNN har i den friske hjerne. Dette er avgjørende for senere å kunne forstå hva som går galt ved sykdom.
4 Antall dyr og art: Det søkes om å bruke 400 mus til prosjektet av følgende muselinjer: C57/Bl6: 30. PV cre: 100, Acan-loxP.100, Acan-loxP/PVcre 170
5 Hvordan etterleve 3R: Vi etterstreberer å maksimere data fra hvert dyr vi benytter i forsøk. Etter in vivo forsøk vil vi ta vare på hjernevevet og gjøre immunohistokjemi og andre relevante analyser av vevet. Alle operasjoner utføres med adekvat analgesi før og etter operasjon. For å begrense antall dyr og få mest mulig data fra hvert dyr ønsker vi også å importere dyr fra Institutt for biovitenskap, UiO som har vært gjennom adferdsforsøk e.l. slik at vi kan gjøre terminale forsøk på hjerneskiver med vårt utstyr på IMB. Vi vil benytte begge kjønn i forsøkene.
2 Skadevirkning: Basert på tidligere erfaring med slike forsøk anser vi at de fleste av forsøkene klassifiseres som moderat belastende. Dyrene vil gjennomgå en kortvarig operasjon med injeksjon av genetisk markør. Etter noen uker er genutrykket tilstrekkelig til at vi kan gjennomføre forsøk in vivo eller terminale forsøk in vitro.
3 Forventet nytteverdi: Både internevroner og perinevrale nett er tidligere vist å ha stor betydning for normal hjernefunksjon, men vi vet fortsatt lite om samspillet mellom dem og om hvordan de reguleres. Internevroner regulerer ned aktiviteten til nevronene de er i kontakt med og bidrar til å beholde balanse mellom eksitasjon og inhibisjon. Perinevrale nett (PNN) pakkes tett rundt PV+ internevroner og påvirker deres aktivitet og funksjon. Sammen er de essensielle for å regulere balansen mellom plastisitet og stabilitet. Dette er relevant for mange hjernesykdommer (f.eks epilepsi og schizofreni). I dette prosjektet vil vi undersøke hvilken rolle PV+ celler og PNN har i den friske hjerne. Dette er avgjørende for senere å kunne forstå hva som går galt ved sykdom.
4 Antall dyr og art: Det søkes om å bruke 400 mus til prosjektet av følgende muselinjer: C57/Bl6: 30. PV cre: 100, Acan-loxP.100, Acan-loxP/PVcre 170
5 Hvordan etterleve 3R: Vi etterstreberer å maksimere data fra hvert dyr vi benytter i forsøk. Etter in vivo forsøk vil vi ta vare på hjernevevet og gjøre immunohistokjemi og andre relevante analyser av vevet. Alle operasjoner utføres med adekvat analgesi før og etter operasjon. For å begrense antall dyr og få mest mulig data fra hvert dyr ønsker vi også å importere dyr fra Institutt for biovitenskap, UiO som har vært gjennom adferdsforsøk e.l. slik at vi kan gjøre terminale forsøk på hjerneskiver med vårt utstyr på IMB. Vi vil benytte begge kjønn i forsøkene.