Betydningen av 4-Hydroxynonenal i utvikling av melaninflekker i laks.
1 Formål
Selv om en i dag har noe kunnskap om hva som karakteriserer melaninflekker i laks, vet en mindre om hva som er utløsende faktorer for at flekkene oppstår. Det er observert at oksidativt stress kan være medvirkende, og at økt mengde av antioksidanter i foret kan hemme utvikling av flekker. I denne studien vil vi teste om naturlige ‘restprodukter’ etter oksidativt stress kan bidra til å utvikle melaninflekker.
Fettsyresammensetningen i oppdrettslaksens fôr og fisken selv, har endret seg og inneholder nå høyere konsentrasjoner omega-6 fettsyrer. Dette kan være uheldig under driftsbetingelser som fremmer oksidativt stress, som for eksempel trenging, avlusing og hypoksi. I dette forsøket ønsker vi å undersøke om det er en sammenheng mellom melaninflekker i laksens muskel og peroksidprodukter fra omega-6 fettsyrer. Økt oksidativt stress og cellulær dysfunksjon kan oppstå som følge av ikke enzymatisk degradering av langkjedede flerumettede fettsyrer og det er kun omega-6 fettsyrer som linolensyre og arakidonsyre som kan resultere i produksjon av 4-hydroxynonenal (4-HNE) (Schwarzer et al., 2015). Dette peroksidasjonsproduktet er naturlig forekommende i relativt høye konsentrasjoner, er mer stabilt enn andre radikalprodukter og vil diffundere til omkringliggende celler. Under normale fysiologiske forhold er intracellulær 4-HNE konsentrasjon  5 μM, men vil øke opp til 100 ganger under oksidativt stress (Zhang and Forman 2017). I pattedyr virker 4-HNE som en kjemoattraktant for leukocytter og vil øke infiltrasjon av immunceller (Chacko et al.,2016). Hensikten med forsøket er å undersøke om simulering av oksidativt stress ved hjelp av 4-HNE injeksjon i muskel kan fremkalle melaninflekker hos laks. Melaninflekker i laksemuskel er et kvalitetsproblem i lakseoppdrett, som forekommer hos 15-20% av slaktefisken. ¬
2 Skadevirkninger
Det forventes ingen permanente skadevirkninger på fisken, men ubehag/stress i forbindelse med injisering av 4-HNE i muskel.
3 Forventet nytteverdi
Melaninflekker i laksemuskel er et kvalitetsproblem i lakseoppdrett, som forekommer hos 15-20% av slaktefisken. Dette medfører betydelige ekstrakostnader ved at flekkene enten må fjernes manuelt, eller at fileten nedgraderes i pris/kvalitet.
Hvis vi kan vise at 4-HNE øker forekomsten av flekker, kan det ha konsekvenser for fôrsammensetning (nivå av antioksidanter) og avlsarbeidet for høyere nivå av antioksidanter i laksemuskel.
4 Antall dyr og art
Til sammen 40 laks (Salmo salar).
5 Hvordan etterleve 3R
Erstatning: For å studere effekten av oksidative stress på melaninflekker finnes det i dag ingen alternativer til in vivo-forsøk.
Reduksjon: Antallet fisk holdes så lavt som mulig, men må samtidig være høyt nok til å kunne gi statistisk sikre resultater.
Forbedring: Fisken bedøves i forbindelse med injisering an HNE.
Selv om en i dag har noe kunnskap om hva som karakteriserer melaninflekker i laks, vet en mindre om hva som er utløsende faktorer for at flekkene oppstår. Det er observert at oksidativt stress kan være medvirkende, og at økt mengde av antioksidanter i foret kan hemme utvikling av flekker. I denne studien vil vi teste om naturlige ‘restprodukter’ etter oksidativt stress kan bidra til å utvikle melaninflekker.
Fettsyresammensetningen i oppdrettslaksens fôr og fisken selv, har endret seg og inneholder nå høyere konsentrasjoner omega-6 fettsyrer. Dette kan være uheldig under driftsbetingelser som fremmer oksidativt stress, som for eksempel trenging, avlusing og hypoksi. I dette forsøket ønsker vi å undersøke om det er en sammenheng mellom melaninflekker i laksens muskel og peroksidprodukter fra omega-6 fettsyrer. Økt oksidativt stress og cellulær dysfunksjon kan oppstå som følge av ikke enzymatisk degradering av langkjedede flerumettede fettsyrer og det er kun omega-6 fettsyrer som linolensyre og arakidonsyre som kan resultere i produksjon av 4-hydroxynonenal (4-HNE) (Schwarzer et al., 2015). Dette peroksidasjonsproduktet er naturlig forekommende i relativt høye konsentrasjoner, er mer stabilt enn andre radikalprodukter og vil diffundere til omkringliggende celler. Under normale fysiologiske forhold er intracellulær 4-HNE konsentrasjon  5 μM, men vil øke opp til 100 ganger under oksidativt stress (Zhang and Forman 2017). I pattedyr virker 4-HNE som en kjemoattraktant for leukocytter og vil øke infiltrasjon av immunceller (Chacko et al.,2016). Hensikten med forsøket er å undersøke om simulering av oksidativt stress ved hjelp av 4-HNE injeksjon i muskel kan fremkalle melaninflekker hos laks. Melaninflekker i laksemuskel er et kvalitetsproblem i lakseoppdrett, som forekommer hos 15-20% av slaktefisken. ¬
2 Skadevirkninger
Det forventes ingen permanente skadevirkninger på fisken, men ubehag/stress i forbindelse med injisering av 4-HNE i muskel.
3 Forventet nytteverdi
Melaninflekker i laksemuskel er et kvalitetsproblem i lakseoppdrett, som forekommer hos 15-20% av slaktefisken. Dette medfører betydelige ekstrakostnader ved at flekkene enten må fjernes manuelt, eller at fileten nedgraderes i pris/kvalitet.
Hvis vi kan vise at 4-HNE øker forekomsten av flekker, kan det ha konsekvenser for fôrsammensetning (nivå av antioksidanter) og avlsarbeidet for høyere nivå av antioksidanter i laksemuskel.
4 Antall dyr og art
Til sammen 40 laks (Salmo salar).
5 Hvordan etterleve 3R
Erstatning: For å studere effekten av oksidative stress på melaninflekker finnes det i dag ingen alternativer til in vivo-forsøk.
Reduksjon: Antallet fisk holdes så lavt som mulig, men må samtidig være høyt nok til å kunne gi statistisk sikre resultater.
Forbedring: Fisken bedøves i forbindelse med injisering an HNE.