Direkte måling av aktiverte HPA-1a-spesifikke CD4 T celler ved bruk av pL33-HLA-DR52a multimerer

Godkjenningsdato
Godkjent fra
Godkjent til
Føtal/neonatal alloimmun trombocytopeni (FNAIT) er en tilstand som rammer nyfødte når mors immunforsvar angriper et protein på overflaten av barnets blodplater som mor mangler, oftest blodplateantigenet HPA-1a. Dersom fosteret har HPA-1a på sine blodplater, kan mors immunsystem aktiveres og lage antistoffer mot HPA-1a. Antistoffene transporteres over morkaken til barnets blod, hvor de binder og ødelegger barnets blodplater slik at barnet kan utvikle blodplatemangel. Vi vet at aktivering av T celler vanligvis er det første trinnet i immunresponser som produserer antistoffer, og har tidligere vist at dette sannsynligvis også er tilfelle for produksjon av antistoffene som forårsaker FNAIT.

For å studere T cellene som setter i gang disse immunresponsene har vi etablert en musemodell som lar oss aktivere T celler med HPA-1a. Vi har benyttet oss av ELISPOT-metoden for å måle aktiverte HPA-1a-spesifikke T celler hos mus, men metoden er utfordrende pga mye bakgrunn som gjør det vanskelig å påvise antigenspesifikk T celleaktivering. Her vil vi teste en ny metode med spesielle molekyler festet til HPA-1a, som kun vil binde T celler som er spesifikke for HPA-1a. Dette reagenset vil la oss måle aktiverte HPA-1a-spesifikke celler direkte, etter immunisering med HPA-1a. Forsøket er en del av et større prosjekt for å utrede mekanismer for T cellenes rolle i immunisering mot blodplater i svangerskapet.

Forventede skadevirkninger

Det er ikke forventet at immunisering av mus vil være til skade for dyrene, da vi aktiverer helt naturlige prosesser som involverer dyrenes eget immunapparat. Måling av T celleaktivering blir gjort på celler isolert fra lymfeknuter og milt etter at dyrene er avlivet.

Forventet vitenskapelig og samfunnsmessig nytteverdi

Blodplatene er nødvendige for å stanse blødninger. Barn født med blodplatemangel får derfor økt blødningstendens og er utsatt hjerneblødninger som kan være dødelige eller gi alvorlige nevrologiske senskader. Vårt mål er å utvikle en behandling som forhindrer aktivering av T cellene som starter immunresponsen mot blodplatene.

Vår musemodell har en høy vitenskapelig verdi da den kan brukes til å studere generelle mekanismer for T celleaktivering, samt metoder som forhindrer T celleaktivering eller slår av aktiverte T celler. Dette kan generere kunnskap som kan være nyttig også for andre tilstander som involverer uønsket aktivering av T celler, for eksempel autoimmune sykdommer.

Antall og type dyr

Vi søker å bruke inntil 33 mus. Musestammen er modifisert slik at de samme molekylene som er involvert i aktivering av blodplatespesifikke T celler i forbindelse med FNAIT også er tilstede i musene.


Erstatning, reduksjon og forbedring

Aktivering av systemiske immunresponser er avhengig av et komplekst samspill mellom kroppens blodsirkulasjon, lymfesystem, celler og lymfoide vev og organer som lymfeknuter og milt. Det finnes per i dag ingen systemer som kan gjenskape dette in vitro.
Dyrene blir nøye overvåket under forsøket og vi ser etter tegn på uønskede reaksjoner etter injeksjoner, selv om dette ikke forventes.