Direkte måling av aktiverte HPA-1a-spesifikke CD4 T celler ved bruk av pL33-HLA-DR52a multimerer
Føtal/neonatal alloimmun trombocytopeni (FNAIT) er en tilstand som rammer nyfødte når mors immunforsvar angriper et protein på overflaten av barnets blodplater som mor mangler, oftest blodplateantigenet HPA-1a. Dersom fosteret har HPA-1a på sine blodplater, kan mors immunsystem aktiveres og lage antistoffer mot HPA-1a. Antistoffene transporteres over morkaken til barnets blod, hvor de binder og ødelegger barnets blodplater slik at barnet kan utvikle blodplatemangel. Vi vet at aktivering av T celler vanligvis er det første trinnet i immunresponser som produserer antistoffer, og har tidligere vist at dette sannsynligvis også er tilfelle for produksjon av antistoffene som forårsaker FNAIT.
For å studere T cellene som setter i gang disse immunresponsene har vi etablert en musemodell som lar oss aktivere T celler med HPA-1a. Vi har benyttet oss av ELISPOT-metoden for å måle aktiverte HPA-1a-spesifikke T celler hos mus, men metoden er utfordrende pga mye bakgrunn som gjør det vanskelig å påvise antigenspesifikk T celleaktivering. Her vil vi teste en ny metode med spesielle molekyler festet til HPA-1a, som kun vil binde T celler som er spesifikke for HPA-1a. Dette reagenset vil la oss måle aktiverte HPA-1a-spesifikke celler direkte, etter immunisering med HPA-1a. Forsøket er en del av et større prosjekt for å utrede mekanismer for T cellenes rolle i immunisering mot blodplater i svangerskapet.
Forventede skadevirkninger
Det er ikke forventet at immunisering av mus vil være til skade for dyrene, da vi aktiverer helt naturlige prosesser som involverer dyrenes eget immunapparat. Måling av T celleaktivering blir gjort på celler isolert fra lymfeknuter og milt etter at dyrene er avlivet.
Forventet vitenskapelig og samfunnsmessig nytteverdi
Blodplatene er nødvendige for å stanse blødninger. Barn født med blodplatemangel får derfor økt blødningstendens og er utsatt hjerneblødninger som kan være dødelige eller gi alvorlige nevrologiske senskader. Vårt mål er å utvikle en behandling som forhindrer aktivering av T cellene som starter immunresponsen mot blodplatene.
Vår musemodell har en høy vitenskapelig verdi da den kan brukes til å studere generelle mekanismer for T celleaktivering, samt metoder som forhindrer T celleaktivering eller slår av aktiverte T celler. Dette kan generere kunnskap som kan være nyttig også for andre tilstander som involverer uønsket aktivering av T celler, for eksempel autoimmune sykdommer.
Antall og type dyr
Vi søker å bruke inntil 33 mus. Musestammen er modifisert slik at de samme molekylene som er involvert i aktivering av blodplatespesifikke T celler i forbindelse med FNAIT også er tilstede i musene.
Erstatning, reduksjon og forbedring
Aktivering av systemiske immunresponser er avhengig av et komplekst samspill mellom kroppens blodsirkulasjon, lymfesystem, celler og lymfoide vev og organer som lymfeknuter og milt. Det finnes per i dag ingen systemer som kan gjenskape dette in vitro.
Dyrene blir nøye overvåket under forsøket og vi ser etter tegn på uønskede reaksjoner etter injeksjoner, selv om dette ikke forventes.
For å studere T cellene som setter i gang disse immunresponsene har vi etablert en musemodell som lar oss aktivere T celler med HPA-1a. Vi har benyttet oss av ELISPOT-metoden for å måle aktiverte HPA-1a-spesifikke T celler hos mus, men metoden er utfordrende pga mye bakgrunn som gjør det vanskelig å påvise antigenspesifikk T celleaktivering. Her vil vi teste en ny metode med spesielle molekyler festet til HPA-1a, som kun vil binde T celler som er spesifikke for HPA-1a. Dette reagenset vil la oss måle aktiverte HPA-1a-spesifikke celler direkte, etter immunisering med HPA-1a. Forsøket er en del av et større prosjekt for å utrede mekanismer for T cellenes rolle i immunisering mot blodplater i svangerskapet.
Forventede skadevirkninger
Det er ikke forventet at immunisering av mus vil være til skade for dyrene, da vi aktiverer helt naturlige prosesser som involverer dyrenes eget immunapparat. Måling av T celleaktivering blir gjort på celler isolert fra lymfeknuter og milt etter at dyrene er avlivet.
Forventet vitenskapelig og samfunnsmessig nytteverdi
Blodplatene er nødvendige for å stanse blødninger. Barn født med blodplatemangel får derfor økt blødningstendens og er utsatt hjerneblødninger som kan være dødelige eller gi alvorlige nevrologiske senskader. Vårt mål er å utvikle en behandling som forhindrer aktivering av T cellene som starter immunresponsen mot blodplatene.
Vår musemodell har en høy vitenskapelig verdi da den kan brukes til å studere generelle mekanismer for T celleaktivering, samt metoder som forhindrer T celleaktivering eller slår av aktiverte T celler. Dette kan generere kunnskap som kan være nyttig også for andre tilstander som involverer uønsket aktivering av T celler, for eksempel autoimmune sykdommer.
Antall og type dyr
Vi søker å bruke inntil 33 mus. Musestammen er modifisert slik at de samme molekylene som er involvert i aktivering av blodplatespesifikke T celler i forbindelse med FNAIT også er tilstede i musene.
Erstatning, reduksjon og forbedring
Aktivering av systemiske immunresponser er avhengig av et komplekst samspill mellom kroppens blodsirkulasjon, lymfesystem, celler og lymfoide vev og organer som lymfeknuter og milt. Det finnes per i dag ingen systemer som kan gjenskape dette in vitro.
Dyrene blir nøye overvåket under forsøket og vi ser etter tegn på uønskede reaksjoner etter injeksjoner, selv om dette ikke forventes.