Pulmonary metastasis assay

Godkjenningsdato
Godkjent fra
Godkjent til
Mange ulike kreftformer vil ofte metastasere til lungene, og det er av interesse å vite hva som gjør at de vil vokse i lungene og hvilke behandlinger som vil påvirke vekst av celler i lungene.
Pulmonary metastasis assay (PUMA) er en ex vivo metode for å undersøke om kreftceller vokser i lungene og hvordan medikamenter påvirker celleveksten til kreftceller i lungene til mus. Celler merket med Green fluorescent protein (GFP) eller red fluorescent protein (RFP) blir sprøytet i.v i mus. Musa blir avlivet 15 min etter injeksjon av cellene. Musene vil ikke gå så lenge at de opplever smerte eller vekttap i forbindelse med vekst av kreftceller, og det er derfor et lite belastende forsøk for musene. Ved avlivning vil musene bli lagt i gassanestesi med sevofluran og en overdose pentobarbital blir injisert intraperitonalt. Musene forblir i gassanestesien til det er sikkert at musa er død. En agaroseblanding tilsettes til lungene via trachea og lungene kan så deles inn i skiver. Disse skivene plasseres på en gelfoam sponge som er omgitt av medium. Lungeskivene kan så observeres i mikroskop som kan detektere Green fluoroscent protein (GFP), og cellene vil da være tydelige. Siden en får flere lungeskiver fra en mus kan det tilsettes ulike inhibitorer eller medikament i de ulike lungeskivene, og en kan se om det er noen effekt av medikamentene ex vivo før en evnt gjør in vivo forsøk. Lungebitene kan gå opp mot 3 uker før de mister sin struktur og forsøket må avsluttes.
Dette er forsøk laget med tanke på reduksjon av antall mus, ved å gjøre dette ex vivo istedenfor in vivo vil vi da kunne redusere antall mus kraftig. Det kan være aktuelt å verifisere resultatene som er sett med denne typen metode in vivo, men det vil da bare være de beste og mest lovende behandlingene som vil bli brukt.
Sidene musene avlives kort tid etter injeksjon av celler er det forventet lite skadevirkning på dyrene.
Det søkes om 100 nude mus.